感染性・複製能をもつウイルスを検出する臨床検査のウイルス培養法

方法

• 従来の細胞培養：検体を1種類以上の細胞株に接種し、培養する。技術者は数日から数週間にわたり培養を観察して細胞変性を確認するか、検査法を用いてウイルスタンパク質または核酸を検出する。
• シェルバイアル培養：検体を小型バイアル内の感受性細胞の単層に遠心接種し、ウイルスと細胞の接触を促進する。その後、ウイルス抗原またはその他のマーカーを検出するため、通常の培養より早期に同定できることが多い。

用途と結果の解釈

ウイルス培養は感染性ウイルスの存在を確認し、ウイルス分離、株の性状解析、一部の感受性試験に重要である。培養陽性は、検体中の病原体が選択された細胞系で複製可能であったことを示す。培養には生きたウイルス、適切な細胞種および条件が必要であるため、陰性結果であっても感染を完全には否定できない。

利点と限界

• 利点：さらなる研究に用いる生きたウイルスを得られ、感染性を直接示すことができ、表現型試験が必要なウイルスに使用できる。
• 限界：一般にPCRなどの分子学的手法より時間を要し、病原体によっては感度が低く、専門的な封じ込め設備と生存可能な病原体を必要とする。迅速抗原検査や核酸増幅法を含む現代的な代替法により、多くの呼吸器ウイルスおよび腸管ウイルスでは培養の日常的な使用が減少している。

臨床上および歴史上の注記

シェルバイアル培養は、増殖の遅い病原体の検出時間を短縮するために開発された。とりわけサイトメガロウイルスなどの感染症の診断改善と関連しており、ウイルス抗原を早期に同定することで、従来培養と比べて結果報告までの時間が短縮される。方法の選択は、臨床上の必要性、利用可能な検査施設、ならびに疑われるウイルスの性質に依存する。